一、材料

1. 移液管圓筒（用于收集用過的移液管）

2. 消毒劑：次氯酸鹽，用清潔劑稀釋，**少應含有 300 μg/g 的氯（如常規用的次氯酸鈉）

3. 清潔劑（如 7 X 或 Decon）

4. 不銹鋼籃子（收集清洗過的移液管然后晾干）

5. 無菌指示器

6. 移液管罐（在兩端分別有硅樹脂墊的正方形的鋁或不銹鋼的容器；正方形的罐子不會滾動）（Thermo Electron）

7. 無菌指示膠帶或塞（Bennett）

8. 滅菌烤箱：在有風扇的情況下溫度可以達到 160°C，更適宜使用可記錄溫度計和易彎曲的探針。

二、操作步驟

收集和清洗 

1. 將含有消毒劑的清潔劑倒入裝移液管的圓筒中。

2. 用后取掉吸頭，立即將移液管棄于圓筒中（圖 11.5）。
(a) 不要將移液管放在層流罩內，也不能讓它變干。
(b) 不要將用于吸瓊脂或硅樹脂（防水劑或防沫劑等）的移液管與普通移液管放在同一個圓筒中。可用一次性的移液管吸硅樹脂，吸完瓊脂的移液管應用加熱的自來水清洗，或者也可用一次性的移液管。

3. 移液管需浸泡過夜或**少 2 h。如果移液管的用量很多，應不時將裝滿的圓筒取回，加清洗液前先浸泡 2 h。

4. 浸泡后通過壓縮空氣取出棉花塞。

5. 將移液管放入移液管清洗器中，**朝上（圖 11.4、圖 11.5，亦見圖 4.6）。

6. 用自來水通過清洗器的虹吸作用清洗移液管，**少 4 h，也可用帶有移液接頭的自動清洗機來清洗，但不要加清潔劑。

7. 將閥門轉到去離子水（DW）或反向滲透水（ROW）處（圖 4.6），或者等自來水沖洗完畢后，再用 DW 或 ROW 灌滿、倒空，重復沖洗 3 次（在玻璃器皿清洗機中用自動去離子水漂洗循環）。

8. 將移液管放入移液管干燥機或烤箱中，**朝上。

9. 用棉花塞住管口（圖 11.6）。

10. 將移液管按大小分類并儲存在無塵環境中。

滅菌

1. 將移液管放入裝移液管的罐中（兩端貼上標有移液管大小的標簽是非常重要的）。

2. 每個罐子裝同一大小的移液管。

3. 少數幾個罐子裝 1 ml、2 ml、10 ml、25 ml 的移液管（例如，每個型號裝 4 個）。

4. 在蓋子和罐子之間貼上無菌指示膠帶，并在膠帶上寫上日期。

5. 干熱滅菌，160°C 1 h。要盡可能少用膠帶，或換用溫度指示標簽（Alpha Medical；Bennnet），此標簽很小并不含爆炸性物質。要在烤箱的中心檢測溫度，以保證這個**難到達的部位也能滿足**低的滅菌條件。要保證烤箱 中的罐子之間有一定的空隙，這樣可以使熱空氣流通（圖 11.7）。

6. 從烤箱中取出移液管，冷卻后將罐子拿到組織培養實驗室。移液管可放置 48 h 以上，但要沿著罐子蓋周圍貼上膠帶。